客户咨询热线:
13811215349
Product Center产品中心

组织研磨仪

简要描述:补充:如果需要提取的样品比较多(比如1g),研磨好的样品在后续的提取中,需要转移到大的epp管中,研磨时可以加入较少的抽提液,研磨完毕按照1g样品10ml提取液补充抽提液,进行后续的操作。

  • 产品型号:GT100
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2022-08-15
  • 访  问  量:968
详情介绍
  组织研磨仪可在1-3分钟内对硬性、软性、弹性等样品进行快速有效的干磨或湿磨,亦可达到对粉体及混浊液混合、均相化的目的,还可以进行低温液氮冷冻研磨,也可以进行生物细胞破碎和DNA/RNA提取。组织研磨机可研磨的样品种类包括:植物组织、动物组织、细胞、细菌、芽孢和酵母等。
 
 
  组织研磨仪采用上下垂直高速振荡模式,可快速促进细胞快速破碎、细胞裂解、组织均匀,使样品研磨更加均匀;对样品研磨的重复性更好,样品间无交叉污染,节省时间和人工成本,是一种效率很高的样品预处理设备。其还具有冷冻组件,可满足用户研磨和保存温度敏感样品的需求。
 
 
  组织研磨仪工作原理
  组织研磨仪本质是二维振动球磨仪,是通过振动的方式来实现对样品的粉碎研磨。研发生产的组织研磨仪,其工作区域安装有两个可高频次振动(每分钟可达1500次)的摇臂,摇臂形似机械手,可放置球磨罐或研磨适配器。
  设备工作时,两只摇臂作"∞"形运动,即水平摆动,其带动球磨罐内部的研磨球,赋予其动能,研磨球在容器内进行高频次、无规则的运动,实现对样品的撞击和挤压,完成粉碎和研磨。
 
 

组织研磨仪

 

 
  组织研磨仪详细的操作步骤如下:
  1、在离心管中加入样品、研磨球、裂解液(可省),盖上盖;
  2、将装好样品的离心管放入适配器中;
  3、将适配器及装有样品的离心管浸入液氮中进行预冷冻;
  4、将适配器装到主机上,锁紧固定装置;
  5、观赏防护罩,按需求设定好参数后,开始研磨;
  6、等仪器完全停止振动后关机,打开安全门,取出样品;
  7、仪器归位。
 
 
 
  组织研磨仪工艺技术:
  平整度:
  工件的平整度取决于磨盘的平整度。随着加工领域的不断深化及精度和效率要求越来越高:“WEIANDA”从铸铁盘、合成盘、铜盘、纯锡盘、树脂盘发展到金刚石盘,并通过各种方法把盘的平面订修到佳达2um。
  粗糙度:
  表面粗糙度取决于磨料颗粒的大小、形状和磨盘的材料, 以及工件材质及硬度。
  粗磨:
  利用较粗颗粒度的磨料在磨盘与工件面上磨削,进刀量大、效率高;但磨削面较粗,适用于磨削余量较多之工作。
  中磨:
  利用中度颗粒的磨料在磨盘与工件面上磨削,进刀量快、效率高,表面粗糙度适中,适合磨削量一般之工件。
  精磨:
  利用较细颗粒度的磨料在磨盘中与工件面上磨削,进刀量较小、表面光洁度好,磨削痕均匀而细。
  软抛光:
  利用磨盘上加装一个特殊材料抛光垫或抛光布,抛光料在抛光垫或抛光布之间运动,使工件比硬抛光更有超镜子一样的高光洁度。
  硬抛光:
  利用合成盘、铜盘、锡盘、树脂盘等非常高精密度的基面加入微米级金刚石磨料,使工件表面变得既高精密平面度,又有像镜子一样的高光洁度。
 
 
 
 
  组织研磨仪的使用方法:
  1、将仪器放置在干燥通风的环境中,插上电源,观察仪器控制显示器是否正常亮灯。打开仪器,测试控制按钮是否能正常使用,仪器空载运行时是否有异响。
  2、将适量样品和研磨球放入球磨罐中,预留一定的研磨空间。初次研磨建议保持样品和研磨球各占球磨罐容积的三分之一。
  3、若需要预冷冻,可将装有样品的球磨罐放入液氮环境中冷却3分钟以上,然后再装入仪器进行研磨。使用液氮进行预冷冻时,应做好防护措施,防止被冻.伤。
  4、将球磨罐放入高通量组织球磨仪的夹具内,慢慢转动转轮,依靠自动定位的紧固装置固定好球磨罐,盖上盖子。
  5、在控制显示器上设定好研磨仪的运行时间和摆动频次,开始研磨。研磨完成后,转动转轮取下球磨罐。
 
 
  组织研磨仪可对硬性、中硬性和脆性样品进行细粉碎和精细研磨,还适用于软性、弹性、纤维质材料的研磨前处理。既可干磨,也可湿磨,还可进行冷冻低温研磨,在农业、生物医药、食品、地质化工、环境、质检、高校科研等多个行业的实验室都有广泛应用。

  一、 实验试剂:
  1.CTAB抽提液:
  2%(w/v)CTAB
  100 mmol/L Tris-HCl(pH8.0)
  20 mmol/L EDTA(pH8.0)
  1.4 mol/L NaCl
  抽提含多酚较多的植物材料时(比如木本植物),上述抽提液中可另加入2%的PVP(聚乙烯吡咯烷酮)。
  抽提液于室温保存,可在几年内保持稳定。临用之前向装有上述抽提液的试管中加入约2%-3%(v/v)的β-巯基乙醇。
  2、醋酸钠:
  3 mol/L NaAc
  用冰乙酸调pH值至4.8-5.2。
  3、TE溶液:
  4、其它:
  无水乙醇,异丙醇,75%乙醇,酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),氯仿:异戊醇(24:1),β-巯基乙醇,重蒸水。
  二、 实验步骤
  1. 样品研磨
  1) 取1g的样品放入2ml ep管中
  2) 加入1-2粒5mm研磨珠
  3) 加入1ml的CTAB 抽提液
  4) 将加有样品的ep管放入高通量组织研磨仪的适配器中,盖好
  5) 将研磨转速调到1800,设定研磨时间为90秒(可根椐样品的研磨的难易程度来调节,此数据是以银杏落叶为样本得出)
  6) 启动研磨仪对样品进行研磨(根据不同的样品,本身性质不同,需要对研磨频率和研磨时间进行适当的调整)
  2. DNA的粗提
  1) 将研磨好的样品取出于65℃水浴45min,中途间隔(轻柔)振荡三次混匀
  2) 冷却后加入等体积氯仿:异戊醇(24:1),轻柔颠倒混匀使乳化10min
  3) 7000g-8000g离心10min(18-20℃)
  4) 吸取上清于另一干净的离心管中
  5) (根据需要可用氯仿:异戊醇如上法重复抽提一次,吸取上清)
  6) 加入与上清液等体积(且已于-20℃预冷的异丙醇,颠倒混匀,约1至2分钟后应有白色絮状沉淀出现(若没有,则加入上清液1/5至1/10体积的pH4.8-5.2的3M NaAc,混匀,于-20℃冰箱中沉淀30min)
  7) 离心法沉淀DNA
  8) 在75%乙醇中漂洗DNA数分钟以上,用Tip头吸干乙醇
  9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次
  10) 沉淀于室温或64℃以下的恒温箱中干燥片刻至刚出现半透明,不要过度干燥
  11) 用50μlTE溶解沉淀,可用65℃水浴助溶,DNA粗提物可用于粗略PCR等。
  3. DNA的纯化
  1) 向TE溶解的DNA粗提物中入4-10μl RNaseA(约40-100μg)
  2) 于37℃酶解RNA 1hr或65℃酶解RNA 30min以上
  3) 加入50μl酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),轻轻颠倒混匀10min
  4) 10000g以上常温离心10min,吸取上清
  5) 加入50μl仿氯:异戊醇(24:1)轻轻颠倒10min
  6) 10000g以上常温离心10min,吸取上清 (根据需要可重复用氯仿:异戊醇如上法再抽提1-2次,以充分去除蛋白和酚)
  7) 向上清中加入1/5-1/10体积的pH4.8-5.2的3M NaAc,并加入2.5倍体积无水乙醇,于-20℃沉淀30min以上
  8) 12000g、4℃低温离心10min,吸干液体
  9) 沉淀用75%乙醇漂洗二次
  10) 沉淀于室温或64℃以下恒温箱中干燥片刻至刚开始出现半透明状,勿过度干燥加入50μl重蒸水溶解DNA,可于65℃水浴助溶
  11) 取5μl DNA电泳检查DNA的质量
  12) 100-500倍稀释后于分光光度计上测定OD260及OD280,分析DNA的浓度和质量
  13) 保存DNA于-20℃
  补充:如果需要提取的样品比较多(比如1g),研磨好的样品在后续的提取中,需要转移到大的epp管中,研磨时可以加入较少的抽提液,研磨完毕按照1g样品10ml提取液补充抽提液,进行后续的操作。
 
产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7